Kolagen an se yon eleman entèrstisyèl ekstraselilè, ki egziste nan kò a kòm yon estrikti makromolekilè ensolubl epi li konbine avèk polisakarid pwoteyin, glikoprotein, elatriye. pretreatment, Kolagen ekstraksyon, separasyon, ak pirifikasyon nan diferan kalite kolagen an, pami ki ekstraksyon nan kolagen an se pi kritik la.
Seleksyon materyèl tisi ak pretretman
Materyèl tisi yo itilize pou fè ekstraksyon kolagen an dwe ak anpil atansyon pretrete, bagay ki pi enpòtan an se grate apendis ki pa kolagen an tankou vyann mens, grès, elatriye, epi ekstrè grès la ak yon sòlvan òganik pou evite fini ak grès ki gen ladan. lèt kolagen an. likid twoub. Apre plis retire kalsyòm nan tisi zo ak proteoglycan nan tisi Cartilage, materyèl tisi a ka koupe, kraze, oswa omojeneize pou fè ekstraksyon kolagen an.
Ekstraksyon kolagen an ki sòti nan bèt yo
Tradisyonèlman, kolagen an se sitou ekstrè nan po yo ak zo nan bèt terès tankou kochon ak bèt. Li te dènyèman te jwenn ke po pwason, zo, ak balans yo tou rich nan kolagen an. Èkstraksyon kolagen an nan tisi bèt akwatik ka pa sèlman fè tout itilizasyon resous akwatik ak ogmante valè a te ajoute nan pwosesis pwodwi akwatik, men tou redwi polisyon epi yo dwe plis zanmitay anviwònman an. An menm tan an, akòz egzistans la nan maladi bèt tankou maladi bèf fache ak maladi pye ak bouch, moun yo plis vle kwè ke kolagen an akwatik gen pi wo sekirite pase kolagen an ki sòti nan bèt. Se poutèt sa, ekstraksyon kolagen an nan fatra akwakilti, tankou po pwason, balans, ak zo, ap pran pi plis ak plis atansyon.
Pwotokòl ekstraksyon kolagen an komen:
Metòd ekstraksyon asid se yon metòd ekstraksyon kote matyè premyè yo pretrete pa tranpe asid ak Lè sa a, pirifye pa yon seri de operasyon tankou santrifujasyon. Asid komen yo enkli asid idroklorik, asid oksalik, asid acetic, asid acetic, asid asid, ak asid laktik. Grès ki mare a sibi yon reyaksyon saponifikasyon ak yon solisyon alkalin pou retire peptide tèminal ki pa elikal la epi fonn fib kolagen an. Idwoksid sodyòm, kabonat sodyòm, ak idroksid kalsyòm yo souvan itilize ajan tretman alkali. Anba kondisyon alkalin, lyezon peptide kolagen an fasil idrolize, epi estrikti supercoiled li yo pral detwi. Se poutèt sa, gen kèk etid sou ekstraksyon nan kolagen an pa metòd la alkalin. Li fonn nan solisyon asid oswa solisyon sèl net. Youn nan rezon ki fè anzimatik ekstrè kolagen an lajman ki itilize nan materyèl byomedikal se pèfòmans iminitè ki ba li yo, ak anzim yo itilize souvan gen ladan tripsin, pepsin, papain, ak net proteaz.
Ki jan fè kolagen an lakay ou?
Kolagen se fibrin ki pi enpòtan nan po anvan tout koreksyon epi li se eleman prensipal la nan po bèt.
1. Sèvi ak kow bèf kòm matyè premyè, atravè etap pre-tretman kow, ajoute quantitative soda mordan, ajiste pH, ajoute proteaz alkalin, lesivaj, kolekte filtraj, sale soti, santrifuje presipitasyon an, ak friz-seche, kolagen an solid nan Yak vach. se finalman ekstrè. Pou pwodwi pwoteyin, kondisyon yo pi bon preparasyon nan kolagen an po Yak detèmine pa tès la orthogonal yo se yon rapò lesivaj solid-likid nan 1:35 (g: mL), dòz pwoteaz nan 1.5 pousan (fraksyon mas), ak tan lesivaj nan 12 h. , tan lesivaj nan Tanperati a te leve soti vivan nan 36 degre.
2. Pwosesis ekstraksyon nan kolagen an po kochon se jan sa a: ajoute 0.1 mol / L NaOH solisyon dapre rapò a nan 1:10 (g: mL), tranpe ak degrese pou 6 h, idroliz anzimatik pou 24 h, ajoute gout klori sodyòm konplètman fonn solisyon pou sale soti, ki te swiv pa dyaliz ak pirifikasyon nan kolagen an ak solisyon asid acetic ak dlo deyonize, ak lyofilize yo jwenn echantiyon kolagen an.
3. Etap operasyon yo nan èkstraksyon kolagen an nan po pwason pa metòd asid ak metòd ekstraksyon anzim yo montre nan figi a:
